Koirien adrenoseptorigeenin polymorfia ja sen vaikutus anestesiavasteeseen

Abstract

Tutkielman tarkoituksena on selvittää koirien adrenoseptorigeenin polymorfian eli geenin eri muotojen esiintyvyyttä sekä näiden eri geenimuotojen vaikutusta koirien anestesiavasteeseen. Tutkielmaa varten kerättiin 72 koiran verinäytettä, joista eristettiin DNA sekä monistettiin DNA:sta adrenoseptorigeeni ADRA2A:n geenialue ja sekvensoitiin se. Näytteet kerättiin koirien anestesian yhteydessä ja samalla kerättiin tietoja anestesian syvyydestä sekä verenpaineesta ja sydämen sykkeestä anestesian aikana, sillä kyseisellä geenillä oletetaan olevan vaikutusta anestesiavasteeseen. PCR- eli monistusvaiheessa 67:n näytteen geenialueen monistus onnistui, joten lopullisessa aineistossa on 67 näytettä. PCR:ssä käytettyjen alukkeiden kanssa oli vaikeuksia, sillä alukkeet sitoutuivat usein DNA:han epäspesifisesti tai eivät ollenkaan, minkä vuoksi erittäin GC-pitoinen geenin keskiosa jäi monistamatta. Tämän vuoksi tutkimus on tehty geenin alku- ja loppuosan perusteella.

Anestesialääkkeistä tutkimuksessa keskityttiin deksmedetomidiinin vaikutukseen koirilla, sillä deksmedetomidiini on adrenoseptori 2 α:n kautta vaikuttava lääkeaine. Deksmedetomidiini on ihmisille sekä eläimille käytetty rauhoittava nukutusaine, joka aiheuttaa keskushermoston lamaa ja kivuntunnottomuutta.

Geenialueiden sekvensoinnin jälkeen havaittiin, että koirien adrenoseptorigeenissä oli yllättävän vähän muuntelua ihmisen vastaavaan geeniin verrattuna. Kyseisellä alueella olisi mahdollista tehdä vielä jatkotutkimusta monistamatta jääneen geenialueen kohdalla sekä esimerkiksi laajempaa otantaa käyttäen, jotta nähtäisiin, havaitaanko nyt tutkimatta jääneellä alueella tai suuremmalla koiraotannalla enemmän muuntelua.